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          細胞增殖及毒性檢測試劑盒(CCK-8)
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          產品問答
          OD值不一定是1以下才準確,我司產品一般OD1.8以下線性都很好??梢苑判氖褂?。
          OD值不一定是1以下才準確,我司產品一般OD1.8以下線性都很好??梢苑判氖褂?。
          為了避免干擾應洗滌細胞更換培養基后再加 CCK-8檢測。
          CCK-8的OD值是不是越靠近1越好?
          在不含細胞的培養基中加入 CCK-8,培養一定的時間,測定 450 nm 的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗(細胞毒性實驗)時,還應考慮藥物的吸收,可在加入藥物的培養基中加入 CCK-8,培養一定的時間,測定 450 nm 的吸光度作為空白對照。
          細胞培養過程中培養基發生變色,是否影響CCK-8后續實驗?
          當使用標準 96 孔板時,貼壁細胞的最小接種量至少為 1000 個/孔(100 μl 培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于 2500 個/孔(100 μl 培養基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養基總體積的 10%加入 CCK-8 溶液。
          空白對照的設定方法?
          正常來說是會變的,但是變的不大
          每孔接種細胞數量多少為適宜?
          最大應該可以到到0.9。
          CCK-8空白組的OD值會隨著時間變化而變化么?
          空白組應該是0.2左右,不同懸浮細胞不一樣,最好是做個標準曲線。
          用標準品做完標曲后OD值在0.5-0.1之間是正常值嗎?
          "一般情況下,白細胞顯色比較困難,因此需要增加細胞數量和延長 CCK-8 反應時間。懸浮細胞與貼壁細胞相比較難顯色,因此懸浮細胞在加入 CCK-8 培養 0.5-4 小時后,可先從培養箱取出,目測或用酶標儀測定顯色程度,若顯色困難可以繼續培養數小時后再確定。對于貼壁細胞,CCK-8 的培養時間一般為 0.5-4 小時,在培養20 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度。"
          空白組OD值多少算比較好?
          "可以,由于每孔加入 CCK-8 量比較少,有可能因試劑沾在孔壁帶來誤差,建議在加完試劑后輕輕敲擊培養板以幫助混勻?;蛘咧苯优渲煤?10% CCK-8 的培養基,以換液的形式加入。"
          CCK-8 反應時間如何確定?
          "制作標準曲線來測定出未知樣品的細胞數量,具體方法詳見說明書。 此標準曲線的目的是便于確定細胞的接種數量以及加入 CCK-8 后的培養時間。"
          CCK-8是否需要換液添加?
          細胞培養用液
          如何測定細胞數量?這么做目的是什么?
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          質檢證書
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          摩爾濃度計算器
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          Cell Counting Kit-8(簡稱CCK-8),是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。 

          CCK-8試劑中含有WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)是一種類似于MTT的化合物,它在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)存在條件下,可以被線粒體內的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產物Formazan (參考圖1),生成的Formazan數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析,細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。

          WST-8與以往的增殖/毒性測定試劑相比,具有明顯優點(參考表1)。美侖CCK-8試劑盒具有靈敏度高、反應時間短、線性范圍寬、數據可靠、重現性好等特點,可以廣泛應用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗。


          1. 增殖/毒性測定試劑的比較

          檢測方法

          MTT法

          XTT法

          WST-1法

          CCK-8法

          甲瓚產物的水溶性

          差(需加有機溶劑溶解)

          檢測靈敏度

          很高

          很高

          最高

          檢測時間

          較長

          較短

          較短

          最短

          檢測波長

          560-600nm

          420-480nm

          420-480nm

          430-490nm

          細胞毒性

          高,細胞形態完全消失

          很低,細胞形態不變

          很低,細胞形態不變

          很低,細胞形態不變

          試劑穩定性

          一般

          較差

          一般

          很好

          批量樣品檢測

          可以

          非常適合

          非常適合

          非常適合

          便捷程度

          一般

          便捷

          便捷

          非常便捷


          我司所售出產品僅供于科研研究用途(非臨床科研研究),每次銷售產品行為都適用于我司網上所列明的通用銷售條款。

          英文名字:Cell Counting Kit-8
          質量標準:Meilunbio
          請輸入貨號:
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          摩爾濃度計算器 (本計算器可幫助您計算出特定溶液中溶質的質量、溶液濃度和體積之間的關系)
          摩爾濃度計算公式:質量 (g) = 濃度 (mol/L) x 體積 (L) x 分子量 (g/mol)
          質量(g
          =
          濃度 (mol/L)
          x
          體積 (L)
          x
          分子量 (g/mol)
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